【原创】应用棉兰染色法对CSF标本找隐球菌的尝试
2012-06-04 00:02:11| 分类：
真菌
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最近我科将CSF标本墨汁染色找隐球菌的项目转至我室检查，原来在体液室检查，而墨汁染色镜下并不好认出镜下看到的倒底是杂质、细胞、还是隐球菌？所以我们在墨汁染色的同时另外用棉兰染色进行镜检，感觉比墨汁染色要好看，当然这只是初用，以后还要继续进行比较，以下与大家分享镜下图片：
CSF中的细胞：（可见胞内有核）
杂质：
细胞：
墨汁染色：细胞
标本2 ，棉兰染色：大量白细胞，可以看见胞核。
标本2，墨汁染色：细胞，与隐球菌无法辨别，唯一的区别是没有荚膜。
以上是阴性标本。
以下是阳性标本，比较一下，与上面的墨汁染色有区别吗？除了两个相连的菌体外，荚膜并不明显：
此标本抗酸染色，没找到抗酸杆菌，却见到一个典型的菌体：
因为此患者同时送了CSF培养，根据真菌生长特点，我们在CSF培养24h后的培养瓶中取少量液体接种于SDA，室温培养，结果48h长出菌落，而此时培养瓶的固相并没有菌落，液体部分稍微浑浊，于是将瓶置于室温培养，24h后固相见到细微的菌落。这个例子告诉我们，人工血培养很容易漏检隐球菌，应加以注意。
以下是培养菌棉兰染色及培养瓶菌落观察的图片，与大家分享：
棉兰染色同样可以看到荚膜：
培养出的隐球菌有荚膜的例子并不多，但上面的图告诉我们可以尝试用棉兰染色找CSF中的隐球菌，感兴趣的朋友也可以尝试一下。
以下是阳性的CSF标本培养瓶中的变化：
侧面：液体培养24h后，晃动可见微混：
背面：24h没有菌落
转至室温培养24h后，固相看到细微的菌落：
正面：
背面：48h 见细微菌落
侧面：48h 液体进一步浑浊：
鉴定和后续菌落图待续。
2012-6-3
鉴定：ID 32C ,新型隐球菌。
瓶室温培养3d后：
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