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【整理】真菌概述

2006-10-15 14:45:20|  分类: 真菌 |  标签: |举报 |字号 订阅

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真菌概述

结合菌亚门:分为2 纲7 目24 科115 属,600 余种

其中毛霉科、小克银汉霉科、被孢霉科中某些种---- 接合菌病

虫霉科- 蛙粪霉、冠状耳霉---- 虫霉病

子囊菌亚门:6纲1959属,15000余种,主要特征上有性生殖产生子囊和子囊孢子

包括:青霉、曲霉、小孢子菌属、毛癣菌属和组织胞浆菌等有性期

l半知菌亚门:3纲1825个属,约15000种。

包括:酵母、隐球菌属、念珠属、红酵母属、丝孢酵母属、皮肤癣菌、青霉、曲霉部分双相真菌等。

l真菌按菌落形态可分两大类

l霉菌(mould):多细胞,菌丝、孢子

l酵母(yeast):单细胞,芽生孢子,无菌丝,有或无子囊;酵母样真菌无子囊而有菌丝。

l真菌的基本结构:菌丝和孢子

l菌丝:有隔、无隔,形态

l浅部真菌:主要侵犯皮肤角蛋白组织,包括角质层、甲板、毛发和羽毛等

l深部真菌:皮肤、皮下组织,甚至全身的组织和器官

l双相型真菌:荚膜组织胞浆菌、杜波伊斯组织胞浆菌、粗球孢子菌、副球孢子菌、申克孢子丝菌、皮炎芽生菌和马尔尼菲青霉菌等.

l真菌的直接涂片检查:载液:5%~10% KOH液、10%~20%氢氧化钾-二甲亚砜液、生理盐水、印度墨汁

l真菌的染色检查:革兰染色、HE染色、过碘酸锡夫染色(PAS)、嗜银染色(GMS)、吉姆萨或瑞氏染色、乳酸酚棉蓝染色、荧光染色等.

l真菌分离培养与鉴定

培养方法:大培养、小培养培养基:SDA、察氏培养基、马玲薯葡萄糖

琼脂、玉米粉琼脂、麦芽浸膏培养基、脑心浸液葡萄糖琼脂等.

鉴定:生长速度、菌落外观、显微镜检查、生理生化等.

临床常见病原性真菌实验室检验

l  浅部真菌

l  角层癣菌

1、花斑癣菌:名为糠秕马拉色菌,又称糠秕样小孢子菌

直接检查:腊肠形、微弯曲、"S"形菌丝;孢子圆形或椭圆形

培养:乳白色,酵母样菌落

2、掌黑癣菌:为威尼克外瓶霉,曾称威尼克枝孢霉

直接检查:棕色分枝、分隔菌丝及孢子,可见厚膜孢子

培养:SDA上菌落生长慢,酵母样,黑

色,表面有灰黑色气生菌丝,背面黑色。镜检见圆形或椭圆形孢子,有时中央分隔

3、毛结节癣菌:由白吉利丝孢酵母和何德毛结节菌引起

白吉利丝孢酵母:

直接检查:淡绿色分隔菌丝、关节孢子和芽孢

培养:SDA上菌落酵母样,淡黄、深黄至棕色,中央隆起,菌落不下沉

何德毛结节菌

直接检查:见棕色分隔菌丝和关节孢子,毛发结节内有子囊及子囊孢子

培养:在SDA 上,菌落小,紧密,棕色或黑色,中央隆起,火山口状,边缘扁平具不规则的皱褶。日久表面有灰色的短气生菌丝,背面黑色。培养基可能有锈红色色素

l  皮肤癣菌

包括毛癣菌属、小孢子菌属和表皮癣菌属,约40余种,其中20余种可引起人或动物感染。小孢子菌不侵犯甲板,絮状表皮癣菌不累及毛发

鉴定:菌落形态和镜下特征

皮肤癣菌感染毛发可分为发内、发外感染,可形成孢子和菌丝

l  鉴定试验:

1、米饭培养基试验:鉴别奥杜盎小孢子(-)和羊毛状小孢子菌(+)

2、玉米粉吐温琼脂促进红色毛癣菌色素形成

3、DTM用于筛选皮肤癣菌(放线菌酮和抗生素)

4、皮肤癣菌营养试验

5、PDA培养基促进孢子产生

6、尿素酶试验、体外毛发穿孔试验和午氏灯检查等。

毛霉目真菌

引起的感染称毛霉病,毛霉目真菌和虫霉目真菌引起的感染统称为接合菌病。

共同特点:有性繁殖产生接合孢子,无性期产生孢子囊和孢子囊孢子。菌落生长快,稀疏棉花样或羊毛状,后成暗色、棕色或灰色,顶端

有黑色小点为孢子囊。

镜检菌丝薄壁,较宽,

不分隔或极少分隔

1、毛霉属

2、根霉属3、犁头霉属4、根毛霉属

5、共头霉属6、小克银汉霉属

虫霉目真菌

引起接合菌病,包括蛙粪霉属和耳霉

属,显微镜下检查可见宽大、不规则、无

分隔的薄壁真菌菌丝及其片段

1、蛙粪霉属

2、耳霉属

暗色真菌

鉴定的主要依据为镜下形态,重点观察分生孢子梗和分生孢子,研究孢子的形态结构、排列和产孢方式,常见有以下几种类型:①喙枝孢型;②枝孢型;③瓶型;④外瓶霉型;⑤万氏霉型

1、着色芽生菌2、链格孢属3、离蠕孢属

4、枝孢霉属5、弯孢霉属6、毛壳霉7、指霉

8、德氏霉9、外瓶霉

棘状外瓶霉

10、凸脐孢属11、着色霉属

12、瓶霉属13、喙枝孢霉属

镰孢(刀)菌属

青霉属其他真菌

包括:鼻孢子菌、链状芽生菌、新月伊蒙菌、拟青霉属、黑孢子菌属、黑粉菌属、帚霉属、木霉属、单端孢属、金孢子菌属、汉逊酵母属等。

l  毛癣菌属

1、红色毛癣菌

直接检查:皮损及甲屑:分枝、分隔菌丝,可断裂成关节孢子状。毛发:发外孢子排列成串,发内成链状

培养:SDA上菌落羊毛状、绒毛状、粉末状、沟纹状、颗粒状;可产红色色素

2、须(石膏样)毛癣菌

直接镜检:发外链状大孢子,皮、甲内菌丝或孢子

培养:菌落毛状到粉状或颗粒状,表面白色,背面黄、褐或红褐色。螺旋状菌丝、大分生孢子分隔(2-8)呈棒形

3、断发毛癣菌

直接镜检:发内大孢子,皮、甲内分隔菌丝或孢子

培养:菌落粉状到丝绒状,表面白色、米黄、黄或褐色,背面呈黄、暗褐或红褐色。镜检小分生孢子多,梨、棒或球形,大分生孢子少

4、紫色毛癣菌

直接镜检:发内大孢子,皮、甲内分隔菌丝及孢子

培养:菌落生长慢,VitB1促进生长,红到紫色;镜检菌丝粗短、分隔、分枝,可见关节孢子和厚膜孢子,少见大分生孢子

5、许兰毛癣菌名为黄癣菌

直接镜检:发内菌丝,链状孢子,气泡、气沟,皮、甲中菌丝、孢子

培养:生长快慢两种菌落,质地光滑到蜡样,传代培养为丝绒状,新分离物可呈酵母样菌落。镜检特征:有鹿角状菌丝

6、玫瑰色毛癣菌

直接镜检:发外型感染,孢子大,皮和甲屑内见菌丝、孢子

培养:菌落生长慢,白色到红色,表面有绒毛样菌丝,中央凸起。镜检见梨形或短棒状侧生无柄的小分生孢子,大分生孢子少

7、叠瓦毛癣菌

直接检查:皮屑内见粗细一致菌丝交织成网状

培养:SDA上菌落生长慢,蜡状,无羽毛状菌丝,正面淡黄渐成灰褐色或黑色,背面淡棕黄至棕黑色。镜检可见破梳状菌丝,难见大分生孢子

8、疣状毛癣菌

直接检查:发内大孢子,皮屑菌丝

培养:菌落质地光滑,轻微毛状,表面呈白色,有时黄色或灰色。镜检小分生孢子棒形,大分生孢子鼠尾形,链形厚膜孢子

9、马毛癣菌

直接检查:发外型感染,孢子成鞘或链状排列,皮屑内见分枝、分隔菌丝

培养:菌落生长中速,质地毛状,表面呈乳油色到淡黄色,背面深黄色变红褐色。镜检小分生孢子梨形,沿菌丝形成,大分生孢子罕见,梭形到棒形

10、苏丹毛癣菌

直接检查:发内孢子成串,皮屑内见分枝分隔菌丝,有时呈关节菌丝状

培养:菌落生长慢、中速,质地光滑到毡状,淡黄到锈色,有时红紫色。镜检菌丝反向分枝,小分生孢子多或少,梨形卵圆形,大分生孢子少。

11、土毛癣菌

小孢子菌属

1、石膏样小孢子菌

直接检查:发外小孢子,皮屑内见菌丝或成串的孢子

培养:菌落生长快,质地毛状、粉状到颗粒状,表面呈米黄色,背面米黄到红褐色。镜检大分生孢子椭圆到梭形

l  2、犬小孢子菌又名羊毛状小孢子菌

直接检查:发外小孢子,皮屑中菌丝

培养:菌落生长快,质地毛状到羊毛状、棉絮状,表面白到黄色,背面黄到黄桔色,有时苍白色。镜检大分生孢子数量多,梭形、纺锤形,1-12个分隔

l  3、铁锈色小孢子菌

直接检查:发外小孢子,皮屑内见分枝、分隔菌丝

培养:菌落生长慢,质地光滑呈毛状,表面呈黄色、锈色或白色,背面呈锈色或几乎无色。镜检菌丝变形或直,竹样分隔,菌丝较粗,有球拍状及梳状菌丝,厚膜孢子多,少见大小分生孢子

l  4、奥杜盎小孢子菌

直接检查:发外小孢子,皮屑内见分枝、分隔菌丝

培养:菌落生长中速,质地毡状到毛状,表面呈灰色到米黄色,背面呈橙红或苍白色。镜检菌丝分隔,有时有梳状或球拍状菌丝,常见厚膜孢子,少见大小分生孢子

l  5、猪小孢子菌

直接检查:发外小孢子,皮屑内分枝、分隔菌丝

培养:菌落生长中速,质地毛状,表面呈白色到黄色,背面呈红褐色。镜检小分生孢子棒形,大分生孢子卵圆到椭圆,正常仅有2个细胞

l  7、库克小孢子菌

直接检查:皮屑内见分枝分隔菌丝

培养:菌落生长快,表面平,毛状变粉末状,表面白色到黄色,有时变红褐色或暗褐色,背面呈暗红色。镜检小分生孢子卵圆形,量多,大分生孢子梭形,量多

常见曲霉菌鉴定

鉴定依据:

①菌落:菌落生长速度,表面质地、颜色、形态和气味等。其中颜色是曲霉菌分类的依据之一

②分生孢子头:分生孢子头的形状、颜色和大小。分生孢子头由顶囊、瓶梗、梗基和分生孢子链组成,为曲霉的特征性结构

③分生孢子梗或分生孢子柄:注意分生孢子梗的长短、颜色、表面粗糙或光滑、是否有隔等

④具有性生殖的曲霉能产生闭囊壳:为封闭式的薄壁子囊果,含子囊和子囊孢子;

⑤足细胞,也为曲霉的特征性结构。

1、烟曲霉菌

在SDA培养基上菌落生长快,棉花

样,开始为白色,2~3天后转为绿

色,数日后变为深绿色,呈粉末

状。分生孢子头的顶囊烧瓶状,小

梗单层,排列成木栅状,布满顶囊

表面3/4,顶端有链形分生孢子,分生孢子球形,有小棘,绿色

2、黄曲霉菌

在SDA培养基上菌落生长快,黄色,表面粉末状。分生孢子头顶囊球形或近球形,小梗双层,第一层长,布满顶囊表面,呈放射状排列,黄色,顶端有链形孢子

3、土曲霉菌

在SDA培养基上菌落生长快,小,圆形,淡褐色或褐色。分生孢子头的顶囊半球形,小梗双层,第一层短,第二层长,呈放射状排列,分布顶囊表面2/3,顶端有链形孢子

4、黑曲霉菌

在SDA培养基上菌落生长快,表面黑色,粉末状。分生孢子头的顶囊球形或近球形,小梗双层,第一层粗大,第二层短小,呈放射状排列,布满整个顶囊,黑色,顶端有链形孢子

5、杂色曲霉菌

在SDA培养基上菌落生长慢,菌落圆形紧密,绒毛状,羊毛状,颜色有数环,从青绿到红绿。分生孢子头的顶囊近球形,小梗双层,第一层长,第二层短,呈放射状排列,布满顶囊4/5,顶端有链形孢子

6、构巢曲霉菌

在SDA培养基上菌落暗绿色,中央呈粉末状,边缘绒毛状。分生孢子头的顶囊半球形,小梗双层,第一层短,第二层长,呈放射状排列,布顶囊1/2,顶端有链形孢子

双相型真菌

1、组织胞浆菌:荚膜组织胞浆菌(又称南美组织胞浆菌)、杜波伊斯组织胞浆菌(又称非洲组织胞浆菌)。

鉴定依据:

①菌落特征和镜下形态。菌落生长慢,具浓密的气生菌丝,绒毛状或中央成粉末状。正面白色到棕色,背面棕色

②双相型真菌,霉菌相见齿轮状大分生孢子

③组织内酵母相呈细胞内感染

④动物接种

⑤荚膜组织胞浆菌尿素酶试验阳性,而杜波伊斯组织胞浆菌阴性

2、粗球菌孢子菌

传染性强,注意防护。

鉴定依据:

①直接检查或组织病理见球囊和内孢子

②霉菌相生长快,开始像一层潮湿的薄膜,后在菌落边缘形成一圈菌丝,不久颜色由白色变为淡黄或棕色。菌落逐渐变为粉末状

③霉菌相为关节菌丝和关节孢子

④动物接种。

3、副球菌孢子菌

巴西副球孢子菌

鉴定依据:

①直接检查或病理检查见单芽、芽颈宽的厚膜孢子,厚膜孢子形态似水手轮,具特征性

②霉菌相生长慢,常在3周才开始生长。菌落小,表面有白色或棕色的菌丝,稍高出培养基。有些菌落表面平滑或有皱折,中央稍凹陷,有时有开裂,边缘整齐,微微隆起。背面棕色

③动物接种

4、皮炎芽生菌

鉴定依据:

①直接检查或病理检查见圆形或卵圆形、双壁的单芽、芽颈宽的厚膜孢子

②菌落生长慢,开始为酵母样薄膜生长,后有白色绒毛状气生菌丝。正面白色或棕色,颗粒状、粉末状或光滑。背面深棕色

③动物接种

5、申克孢子丝菌

鉴定依据:

①菌落形态及颜色。在SDA培养基室温培养2~3天即有生长,呈霉菌相,典型菌落微高出斜面。初为白色平滑的酵母样,表面湿润,不久变为淡褐色至深褐色或黑色的菌落,有皱褶或沟纹,可有灰白色短绒毛状菌丝。

②梅花状或袖套状排列的小分生孢子

③双相型真菌

④耐放射线菌酮

⑤动物接种

6、马尔尼菲青霉菌

鉴定依据:

①菌落特征及镜下形态。霉菌相,菌落开始为浅灰白色蜡样,膜状,后逐渐变成淡黄或黄绿色。背面红色。2周成淡红色绒毛状菌落。镜检见分枝、分隔菌丝,分生孢子梗光滑,帚状枝二轮生,少数为单轮生,分生孢子椭圆形或球形,有明显的孢间连体。酵母相,初为淡褐色膜状,平坦湿润,以后可有脑回状皱褶。正面棕褐色或玫瑰色

②培养基有红色可溶性色素

③双相型真菌

④细胞内感染有典型的腊肠形分隔的孢子

⑤动物接种

马尔尼菲青霉组织相应与荚膜组织胞浆菌鉴别,后者

细胞内孢子呈圆形或卵圆形、无典型的腊肠形细胞、

芽生、无横隔,必须依靠培养作最后鉴别。

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