真菌概述
结合菌亚门：分为2 纲7 目24 科115 属，600 余种
其中毛霉科、小克银汉霉科、被孢霉科中某些种---- 接合菌病
虫霉科- 蛙粪霉、冠状耳霉---- 虫霉病
子囊菌亚门：6纲1959属，15000余种，主要特征上有性生殖产生子囊和子囊孢子
包括：青霉、曲霉、小孢子菌属、毛癣菌属和组织胞浆菌等有性期
l半知菌亚门：3纲1825个属，约15000种。
包括：酵母、隐球菌属、念珠属、红酵母属、丝孢酵母属、皮肤癣菌、青霉、曲霉部分双相真菌等。
l真菌按菌落形态可分两大类
l霉菌（mould）：多细胞，菌丝、孢子
l酵母（yeast）：单细胞，芽生孢子，无菌丝，有或无子囊；酵母样真菌无子囊而有菌丝。
l真菌的基本结构：菌丝和孢子
l菌丝：有隔、无隔，形态
l浅部真菌：主要侵犯皮肤角蛋白组织，包括角质层、甲板、毛发和羽毛等
l深部真菌：皮肤、皮下组织，甚至全身的组织和器官
l双相型真菌：荚膜组织胞浆菌、杜波伊斯组织胞浆菌、粗球孢子菌、副球孢子菌、申克孢子丝菌、皮炎芽生菌和马尔尼菲青霉菌等.
l真菌的直接涂片检查:载液：5%~10% KOH液、10%~20%氢氧化钾-二甲亚砜液、生理盐水、印度墨汁
l真菌的染色检查:革兰染色、HE染色、过碘酸锡夫染色（PAS）、嗜银染色（GMS）、吉姆萨或瑞氏染色、乳酸酚棉蓝染色、荧光染色等.
l真菌分离培养与鉴定
培养方法：大培养、小培养培养基：SDA、察氏培养基、马玲薯葡萄糖
琼脂、玉米粉琼脂、麦芽浸膏培养基、脑心浸液葡萄糖琼脂等.
鉴定：生长速度、菌落外观、显微镜检查、生理生化等.
临床常见病原性真菌实验室检验
l 浅部真菌
l 角层癣菌
1、花斑癣菌：名为糠秕马拉色菌，又称糠秕样小孢子菌
直接检查：腊肠形、微弯曲、"S"形菌丝；孢子圆形或椭圆形
培养：乳白色，酵母样菌落
2、掌黑癣菌：为威尼克外瓶霉，曾称威尼克枝孢霉
直接检查：棕色分枝、分隔菌丝及孢子，可见厚膜孢子
培养：SDA上菌落生长慢，酵母样，黑
色，表面有灰黑色气生菌丝，背面黑色。镜检见圆形或椭圆形孢子，有时中央分隔
3、毛结节癣菌：由白吉利丝孢酵母和何德毛结节菌引起
白吉利丝孢酵母：
直接检查：淡绿色分隔菌丝、关节孢子和芽孢
培养：SDA上菌落酵母样，淡黄、深黄至棕色，中央隆起，菌落不下沉
何德毛结节菌
直接检查：见棕色分隔菌丝和关节孢子，毛发结节内有子囊及子囊孢子
培养：在SDA 上，菌落小，紧密，棕色或黑色，中央隆起，火山口状，边缘扁平具不规则的皱褶。日久表面有灰色的短气生菌丝，背面黑色。培养基可能有锈红色色素
l 皮肤癣菌
包括毛癣菌属、小孢子菌属和表皮癣菌属，约40余种，其中20余种可引起人或动物感染。小孢子菌不侵犯甲板，絮状表皮癣菌不累及毛发
鉴定：菌落形态和镜下特征
皮肤癣菌感染毛发可分为发内、发外感染，可形成孢子和菌丝
l 鉴定试验：
1、米饭培养基试验：鉴别奥杜盎小孢子(-)和羊毛状小孢子菌(+)
2、玉米粉吐温琼脂促进红色毛癣菌色素形成
3、DTM用于筛选皮肤癣菌（放线菌酮和抗生素）
4、皮肤癣菌营养试验
5、PDA培养基促进孢子产生
6、尿素酶试验、体外毛发穿孔试验和午氏灯检查等。
毛霉目真菌
引起的感染称毛霉病，毛霉目真菌和虫霉目真菌引起的感染统称为接合菌病。
共同特点：有性繁殖产生接合孢子，无性期产生孢子囊和孢子囊孢子。菌落生长快，稀疏棉花样或羊毛状，后成暗色、棕色或灰色，顶端
有黑色小点为孢子囊。
镜检菌丝薄壁，较宽，
不分隔或极少分隔
1、毛霉属
2、根霉属3、犁头霉属4、根毛霉属
5、共头霉属6、小克银汉霉属
虫霉目真菌
引起接合菌病，包括蛙粪霉属和耳霉
属，显微镜下检查可见宽大、不规则、无
分隔的薄壁真菌菌丝及其片段
1、蛙粪霉属
2、耳霉属
暗色真菌
鉴定的主要依据为镜下形态，重点观察分生孢子梗和分生孢子，研究孢子的形态结构、排列和产孢方式，常见有以下几种类型：①喙枝孢型；②枝孢型；③瓶型；④外瓶霉型；⑤万氏霉型
1、着色芽生菌2、链格孢属3、离蠕孢属
4、枝孢霉属5、弯孢霉属6、毛壳霉7、指霉
8、德氏霉9、外瓶霉
棘状外瓶霉
10、凸脐孢属11、着色霉属
12、瓶霉属13、喙枝孢霉属
镰孢(刀)菌属
青霉属其他真菌
包括：鼻孢子菌、链状芽生菌、新月伊蒙菌、拟青霉属、黑孢子菌属、黑粉菌属、帚霉属、木霉属、单端孢属、金孢子菌属、汉逊酵母属等。
l 毛癣菌属
1、红色毛癣菌
直接检查：皮损及甲屑：分枝、分隔菌丝，可断裂成关节孢子状。毛发：发外孢子排列成串，发内成链状
培养：SDA上菌落羊毛状、绒毛状、粉末状、沟纹状、颗粒状；可产红色色素
2、须(石膏样)毛癣菌
直接镜检：发外链状大孢子，皮、甲内菌丝或孢子
培养：菌落毛状到粉状或颗粒状，表面白色，背面黄、褐或红褐色。螺旋状菌丝、大分生孢子分隔(2-8)呈棒形
3、断发毛癣菌
直接镜检：发内大孢子，皮、甲内分隔菌丝或孢子
培养：菌落粉状到丝绒状，表面白色、米黄、黄或褐色，背面呈黄、暗褐或红褐色。镜检小分生孢子多，梨、棒或球形，大分生孢子少
4、紫色毛癣菌
直接镜检：发内大孢子，皮、甲内分隔菌丝及孢子
培养：菌落生长慢，VitB1促进生长，红到紫色；镜检菌丝粗短、分隔、分枝，可见关节孢子和厚膜孢子，少见大分生孢子
5、许兰毛癣菌名为黄癣菌
直接镜检：发内菌丝，链状孢子，气泡、气沟，皮、甲中菌丝、孢子
培养：生长快慢两种菌落，质地光滑到蜡样，传代培养为丝绒状，新分离物可呈酵母样菌落。镜检特征：有鹿角状菌丝
6、玫瑰色毛癣菌
直接镜检：发外型感染，孢子大，皮和甲屑内见菌丝、孢子
培养：菌落生长慢，白色到红色，表面有绒毛样菌丝，中央凸起。镜检见梨形或短棒状侧生无柄的小分生孢子，大分生孢子少
7、叠瓦毛癣菌
直接检查：皮屑内见粗细一致菌丝交织成网状
培养：SDA上菌落生长慢，蜡状，无羽毛状菌丝，正面淡黄渐成灰褐色或黑色，背面淡棕黄至棕黑色。镜检可见破梳状菌丝，难见大分生孢子
8、疣状毛癣菌
直接检查：发内大孢子，皮屑菌丝
培养：菌落质地光滑，轻微毛状，表面呈白色，有时黄色或灰色。镜检小分生孢子棒形，大分生孢子鼠尾形，链形厚膜孢子
9、马毛癣菌
直接检查：发外型感染，孢子成鞘或链状排列，皮屑内见分枝、分隔菌丝
培养：菌落生长中速，质地毛状，表面呈乳油色到淡黄色，背面深黄色变红褐色。镜检小分生孢子梨形，沿菌丝形成，大分生孢子罕见，梭形到棒形
10、苏丹毛癣菌
直接检查：发内孢子成串，皮屑内见分枝分隔菌丝，有时呈关节菌丝状
培养：菌落生长慢、中速，质地光滑到毡状，淡黄到锈色，有时红紫色。镜检菌丝反向分枝，小分生孢子多或少，梨形卵圆形，大分生孢子少。
11、土毛癣菌
小孢子菌属
1、石膏样小孢子菌
直接检查：发外小孢子，皮屑内见菌丝或成串的孢子
培养：菌落生长快，质地毛状、粉状到颗粒状，表面呈米黄色，背面米黄到红褐色。镜检大分生孢子椭圆到梭形
l 2、犬小孢子菌又名羊毛状小孢子菌
直接检查：发外小孢子，皮屑中菌丝
培养：菌落生长快，质地毛状到羊毛状、棉絮状，表面白到黄色，背面黄到黄桔色，有时苍白色。镜检大分生孢子数量多，梭形、纺锤形，1-12个分隔
l 3、铁锈色小孢子菌
直接检查：发外小孢子，皮屑内见分枝、分隔菌丝
培养：菌落生长慢，质地光滑呈毛状，表面呈黄色、锈色或白色，背面呈锈色或几乎无色。镜检菌丝变形或直，竹样分隔，菌丝较粗，有球拍状及梳状菌丝，厚膜孢子多，少见大小分生孢子
l 4、奥杜盎小孢子菌
直接检查：发外小孢子，皮屑内见分枝、分隔菌丝
培养：菌落生长中速，质地毡状到毛状，表面呈灰色到米黄色，背面呈橙红或苍白色。镜检菌丝分隔，有时有梳状或球拍状菌丝，常见厚膜孢子，少见大小分生孢子
l 5、猪小孢子菌
直接检查：发外小孢子，皮屑内分枝、分隔菌丝
培养：菌落生长中速，质地毛状，表面呈白色到黄色，背面呈红褐色。镜检小分生孢子棒形，大分生孢子卵圆到椭圆，正常仅有2个细胞
l 7、库克小孢子菌
直接检查：皮屑内见分枝分隔菌丝
培养：菌落生长快，表面平，毛状变粉末状，表面白色到黄色，有时变红褐色或暗褐色，背面呈暗红色。镜检小分生孢子卵圆形，量多，大分生孢子梭形，量多
常见曲霉菌鉴定
鉴定依据：
①菌落：菌落生长速度，表面质地、颜色、形态和气味等。其中颜色是曲霉菌分类的依据之一
②分生孢子头：分生孢子头的形状、颜色和大小。分生孢子头由顶囊、瓶梗、梗基和分生孢子链组成，为曲霉的特征性结构
③分生孢子梗或分生孢子柄：注意分生孢子梗的长短、颜色、表面粗糙或光滑、是否有隔等
④具有性生殖的曲霉能产生闭囊壳：为封闭式的薄壁子囊果，含子囊和子囊孢子；
⑤足细胞，也为曲霉的特征性结构。
1、烟曲霉菌
在SDA培养基上菌落生长快，棉花
样，开始为白色，2~3天后转为绿
色，数日后变为深绿色，呈粉末
状。分生孢子头的顶囊烧瓶状，小
梗单层，排列成木栅状，布满顶囊
表面3/4，顶端有链形分生孢子，分生孢子球形，有小棘，绿色
2、黄曲霉菌
在SDA培养基上菌落生长快，黄色，表面粉末状。分生孢子头顶囊球形或近球形，小梗双层，第一层长，布满顶囊表面，呈放射状排列，黄色，顶端有链形孢子
3、土曲霉菌
在SDA培养基上菌落生长快，小，圆形，淡褐色或褐色。分生孢子头的顶囊半球形，小梗双层，第一层短，第二层长，呈放射状排列，分布顶囊表面2/3，顶端有链形孢子
4、黑曲霉菌
在SDA培养基上菌落生长快，表面黑色，粉末状。分生孢子头的顶囊球形或近球形，小梗双层，第一层粗大，第二层短小，呈放射状排列，布满整个顶囊，黑色，顶端有链形孢子
5、杂色曲霉菌
在SDA培养基上菌落生长慢，菌落圆形紧密，绒毛状，羊毛状，颜色有数环，从青绿到红绿。分生孢子头的顶囊近球形，小梗双层，第一层长，第二层短，呈放射状排列，布满顶囊4/5，顶端有链形孢子
6、构巢曲霉菌
在SDA培养基上菌落暗绿色，中央呈粉末状，边缘绒毛状。分生孢子头的顶囊半球形，小梗双层，第一层短，第二层长，呈放射状排列，布顶囊1/2，顶端有链形孢子
双相型真菌
1、组织胞浆菌：荚膜组织胞浆菌（又称南美组织胞浆菌）、杜波伊斯组织胞浆菌（又称非洲组织胞浆菌）。
鉴定依据：
①菌落特征和镜下形态。菌落生长慢，具浓密的气生菌丝，绒毛状或中央成粉末状。正面白色到棕色，背面棕色
②双相型真菌，霉菌相见齿轮状大分生孢子
③组织内酵母相呈细胞内感染
④动物接种
⑤荚膜组织胞浆菌尿素酶试验阳性，而杜波伊斯组织胞浆菌阴性
2、粗球菌孢子菌
传染性强，注意防护。
鉴定依据：
①直接检查或组织病理见球囊和内孢子
②霉菌相生长快，开始像一层潮湿的薄膜，后在菌落边缘形成一圈菌丝，不久颜色由白色变为淡黄或棕色。菌落逐渐变为粉末状
③霉菌相为关节菌丝和关节孢子
④动物接种。
3、副球菌孢子菌
巴西副球孢子菌
鉴定依据：
①直接检查或病理检查见单芽、芽颈宽的厚膜孢子，厚膜孢子形态似水手轮，具特征性
②霉菌相生长慢，常在3周才开始生长。菌落小，表面有白色或棕色的菌丝，稍高出培养基。有些菌落表面平滑或有皱折，中央稍凹陷，有时有开裂，边缘整齐，微微隆起。背面棕色
③动物接种
4、皮炎芽生菌
鉴定依据：
①直接检查或病理检查见圆形或卵圆形、双壁的单芽、芽颈宽的厚膜孢子
②菌落生长慢，开始为酵母样薄膜生长，后有白色绒毛状气生菌丝。正面白色或棕色，颗粒状、粉末状或光滑。背面深棕色
③动物接种
5、申克孢子丝菌
鉴定依据：
①菌落形态及颜色。在SDA培养基室温培养2~3天即有生长，呈霉菌相，典型菌落微高出斜面。初为白色平滑的酵母样，表面湿润，不久变为淡褐色至深褐色或黑色的菌落，有皱褶或沟纹，可有灰白色短绒毛状菌丝。
②梅花状或袖套状排列的小分生孢子
③双相型真菌
④耐放射线菌酮
⑤动物接种
6、马尔尼菲青霉菌
鉴定依据：
①菌落特征及镜下形态。霉菌相，菌落开始为浅灰白色蜡样，膜状，后逐渐变成淡黄或黄绿色。背面红色。2周成淡红色绒毛状菌落。镜检见分枝、分隔菌丝，分生孢子梗光滑，帚状枝二轮生，少数为单轮生，分生孢子椭圆形或球形，有明显的孢间连体。酵母相，初为淡褐色膜状，平坦湿润，以后可有脑回状皱褶。正面棕褐色或玫瑰色
②培养基有红色可溶性色素
③双相型真菌
④细胞内感染有典型的腊肠形分隔的孢子
⑤动物接种
马尔尼菲青霉组织相应与荚膜组织胞浆菌鉴别，后者
细胞内孢子呈圆形或卵圆形、无典型的腊肠形细胞、
芽生、无横隔，必须依靠培养作最后鉴别。
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