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日志

 
 

【烦恼】标本直接镜检与细菌培养的矛盾  

2007-02-08 23:19:06|  分类: 交流 |  标签: |举报 |字号 订阅

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    最近收到几例临床送检的无菌区标本,标本直接湿片镜检均可以看到游走的细菌,革兰染色和抗酸染色也看到了细菌,培养24H后增菌瓶出现混浊现象,并有气体向上顶液体培养基的现象,提示应该有菌生长,但转种BAC/MAC/CA分别与需氧和厌氧环境中培养,但转种培养48H后未见细菌生长,这究竟是什么原因呢?慢生长细菌?我们的培养基不适合其中的细菌生长?还是温度不对?真烦恼,临床医生每人一个电话催问结果,报告了染色情况,培养却没有进展,不知道如何向临床交代,,前天我将几份增菌瓶里的细菌转种至罗氏培养基,今天又重新转种置于厌氧环境再次培养,期待有细菌生长。。。

以下是我拍下的一些图片:

标本一:

肝穿刺液:(37度培养5D)

同一患者第二次送肝穿刺液:(脓性,未加通气瓶颈,37度培养48D)

同一患者第二次送肝穿刺液:(脓性,加通气瓶颈,37度培养48D)

取瓶中培养液离心后取沉淀物,

革兰染色镜下:(见到革兰阴性杆菌)

抗酸染色镜下:(也可见到杆菌,但抗酸阴性)

 

标本二:

另一份肝穿刺液(37度增菌培养14天)

侧面:

背面:

正面:

取固体琼脂面培养物抗酸染色:

说明:直接湿片镜检时看到游走的杆菌,经革兰染色见到阳性杆菌(未拍图片),故进一步做抗酸染色,如下图:

以上图片中的细菌会是什么菌?分枝杆菌?但抗酸染色阴性。

标本三:

这是一份骨髓标本,因几天前临床送了一份标本,但培养无细菌生长,今天又送了一份,以下的图片是直接涂片抗酸染色结果:

低倍镜:(物镜10X,目镜10X)(好像有菌丝)

物镜40X,目镜10X:

 

 

谢谢"泉之缘"老师关注,上述三份标本的培养结果: 

标本一:第一次送检标本七天不生长;第二次送检于第三天培养出中间链球菌(专性厌氧菌)。分析原因,可能是增菌瓶的使用有问题,第一次在标本送到实验室后,我们按惯例将上面的瓶颈插在了增菌瓶上,第二次没有插,而是在培养48H后再插上面的瓶颈,待液体被瓶中气体顶上来后马上转种厌氧和需氧同时培养,结果发现其中的细菌是专性厌氧菌,第一次的失败在于增菌瓶过早插入上面的装置,使瓶内处于非厌氧状态。而直接镜检与培养结果的不符合,原因可能是厌氧球菌可呈杆状,当细胞老化时,也有可能失去革兰阳性的特性;另外我的读片能力还存在经验不足之处,因为取培养液离心沉淀物革兰染色镜下看到了一些WBC内成堆的阳性球状物,当时误认为杂质了,所以没有拍下图片。 

今天查找了资料后,了解到中间链球菌可引起脑和肝的深部脓肿。而我们的这例患者正是肝脓肿,病情很严重,我会继续关注此患者的治疗情况。 

标本二:依然没有培养出细菌,怀疑分枝杆菌,等待罗氏培养管的培养结果,时间可能要长一些。 

标本三.骨髓标本生长出铜绿假单胞菌。第一次培养无菌生长的原因是增菌瓶没有通气,因为铜绿假单胞菌是专性需氧菌,而我们当时怕有厌氧菌存在,所以没有通气,哈,这次失败的原因正好与标本一相反,真没则了。。。

此份标本直接涂片革兰染色镜检与培养结果不符合(我误认为有真菌存在),可能还是与我的读片能力有限有关,以后还需加强。 

看来要做好细菌工作并非是件容易的事!!! 

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